Метод определения бактерий Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakij) в продуктах для питания детей раннего возраста
Методические указания устанавливают порядок контроля и методы определения бактерий Enterobacter sakazakii – возбудителей пищевых токсикоинфекций у детей раннего возраста, при осуществлении государственного санитарно-эпидемиологического надзора, а также при санитарно-эпидемиологическом расследовании вспышек пищевых отравлений и инфекций с пищевым путем передачи и предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, в т.ч. импортируемых в Российскую Федерацию, а также лабораторную диагностику заболеваний с пищевым путем передачи. Методические указания могут быть использованы другими лабораторными центрами, осуществляющими контроль качества и безопасности пищевых продуктов и аккредитованными в установленном порядке.
Обозначение:
МУК 4.2.2428-08
Название рус.:
Метод определения бактерий Cronobacter spp. (Enterobacter sakazakij) в продуктах для питания детей раннего возраста
Статус:
действует
Дата актуализации текста:
05.05.2017
Дата добавления в базу:
01.09.2013
Дата введения в действие:
15.12.2008
Утвержден:
29.10.2008 Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач РФ
Опубликован:
Роспотребнадзор (2009 г. )
Ссылки для скачивания:
Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации
4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Метод определения бактерий Enterobacter Sakazakii в продуктах для питания детей раннего возраста
Методические указания МУК 4.2.2428-08
1. Разработаны Государственным учреждением «Научно-исследовательский институт питания» Российской Академии медицинских наук (В.А. Тутельян, С.А. Шевелева, И.Я. Конь, Н.Р. Ефимочкина, И.Б. Быкова, С.Ю. Батищева).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 29 октября 2008 г.
4. Введены в действие с 15 декабря 2008 г.
Руководитель Федеральной службы
по надзору в сфере защиты прав
потребителей и благополучия человека,
Главный государственный санитарный
врач Российской Федерации
Дата введения: 15 декабря 2008 г.
4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Метод определения бактерий Enterobacter Sakazakii в продуктах для питания детей раннего возраста
Методические указания МУК 4.2.2428-08
1. Общие положения и область применения
1.2. Методические указания предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов, в т.ч. импортируемых в Российскую Федерацию, а также лабораторную диагностику заболеваний с пищевым путем передачи. Методические указания могут быть использованы другими лабораторными центрами, осуществляющими контроль качества и безопасности пищевых продуктов и аккредитованными в установленном порядке.
1.3. Контролю на наличие бактерий Е. sakazakii подлежат детские молочные смеси и продукты прикорма сухие, а также специализированные продукты для лечебного и профилактического питания детей первого года жизни, при анализе которых на наличие патогенных микроорганизмов, в т.ч. сальмонелл, не были выявлены облигатные патогены, принадлежащие к родам Salmonella, Shigella, Yersinia, группам энтеровирулентных Escherichia coli, но выявлялся рост сопутствующей грамотрицательной неспорообразующей микрофлоры.
1.5. Предлагаемый метод определения бактерий Е. sakazakii в пищевых продуктах, предназначенных для детей раннего возраста, предусматривает определение наличия или отсутствия указанных микроорганизмов в определенной массе (объеме) продукта в соответствии с нормативами СанПиН 2.3.2.1078-01 «Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов», выраженными в альтернативной форме и основанными на существующей системе отбора образцов и оценки результатов анализа по двухклассной системе. Настоящие методические указания также предусматривают определение количества Е. sakazakii в пищевых продуктах для детей раннего возраста методом наиболее вероятного числа (НВЧ).
1.6. Обнаружение Е. sakazakii в 300 г инстантных молочных смесей и продуктов прикорма сухих, предназначенных для детей 1 года жизни, или в 300 г сухих молочных смесей или специализированных продуктов для детей младше 6 месяцев, должно рассматриваться как присутствие патогенных бактерий в исследуемых образцах, свидетельствующее о высокой степени риска для детей данной возрастной категории, и служить основанием для запрета использования такой продукции с принятием соответствующих мер, направленных на обеспечение безопасности продуктов детского питания.
1.7. Методические указания носят рекомендательный характер.
(Введен дополнительно. Изм. от 26.11.2013 )
2. Сущность метода
2.1. Метод определения бактерий Enterobacter sakazakii (Cronobacter spp.) основан на высеве определенных количеств продукта в жидкие неселективные среды для предварительного обогащения проб, пересеве в жидкие селективные среды для выделения бактерий семейства Enterobacteriaceae, с последующим пересевом на поверхность твердых селективных сред, инкубировании посевов, выявлении в этих посевах бактерий, способных расти и образовывать типичные колонии на поверхности селективного агара, с последующим выделением чистой культуры.
Ниже представлена методическая схема определения Cronobacter spp.
Схема исследования сухих детских смесей на наличие Cronobacter spp.
Cronobacter sakazakii является бактерией семейства энтеробактерий, способной вызывать заболевания у человека. Ранее известный как Enterobacter sakazakii, его присутствие в организме было связано со случаями менингита и гастроэнтерита, особенно в педиатрических больных, хотя это может повлиять на все возрастные группы.
Этимология слова cronobacter очень интересна. Родом из греческого Kronos, титан мифологии, известный тем, что съел каждого из своих детей при рождении, опасаясь пророчества, в котором говорилось, что некоторые из них лишат его силы; пристрастие этой бактерии к детям дало ей название. Bacter это суффикс для любой бактерии.
К сожалению, он известен тем, что время от времени присутствовал в молочных смесях для детей, и был причиной нескольких инфекционных вспышек у младенцев и новорожденных, поступивших в отделения интенсивной терапии новорожденных. Эта связь была подтверждена с помощью научного метода, и статистическая связь была значимой.
Заражение этой бактерией вызывает очень неспецифические желудочно-кишечные симптомы у детей. Если не вовремя лечиться идеальными препаратами, инфекция может перерасти в септик или менингит, особенно у младенцев или недоношенных детей с ослабленным иммунитетом.
Биологические характеристики
Cronobacter sakazakii является грамотрицательной непоровой бациллой, факультативным анаэробом, отрицательной оксидазой и положительной каталазой, принадлежащих к семейству Enterobacteriaceae. Эта бактерия имеет боковые жгутики, которые придают ей подвижность. Он был описан в 2007 году японским микробиологом Рийчи Саказаки; отсюда и название.
Его наиболее важной особенностью является способность образовывать полисахаридную капсулу, которая помогает ей противостоять высыханию и защищает ее от дезинфицирующих средств..
Кроме того, это дает возможность легко прилипать к таким материалам, как пластик, силикон, поликарбонат, стекло и нержавеющая сталь, которые используются в производстве продуктов питания..
Несмотря на инактивацию с пастеризацией и температурой выше 70 ° C, его структурные характеристики позволяют ему выживать в сухих условиях, следовательно, его способность оставаться в порошке детских смесей. Его также можно найти в пакетиках, сухой или обезвоженной пище и даже в сточных водах..
Болезни, которые он производит
Cronobacter sakazakii участвует в тяжелых инфекциях у детей. Хотя возможно, что это также влияет на взрослых, случаи в этой возрастной группе умеренные. Пожилые люди и пациенты с ослабленным иммунитетом могут иногда страдать от серьезных заболеваний, вызванных этим микроорганизмом..
Заболевания, вызванные этой бактерией, включают следующее:
Инфекции центральной нервной системы
Cronobacter sakazakii инфекции могут вызвать менингит, церебрит или энцефалит в уязвимых группах населения.
Некротический энтероколит
Исключительная болезнь новорожденных и младенцев. Это происходит, когда бактерии попадают в желудочно-кишечный тракт хозяина..
сепсис
Системные инфекции и инфекции кровотока распространены у восприимчивых пациентов, особенно недоношенных и иммунодефицитных детей..
симптомы
Серьезность симптомов будет зависеть от затронутой возрастной группы, иммунного статуса и затронутой системы.
В педиатрии
Симптоматология более серьезна у новорожденных и младенцев, которые употребляли в пищу составы с загрязненным молоком. Первые признаки болезни могут быть неспецифичными, такими как лихорадка, безутешный плач, отсутствие аппетита и раздражительность. Через 72 часа после начала картины она имеет тенденцию ухудшаться и становится сепсисом..
При инфекциях центральной нервной системы первыми признаками тяжести являются судороги. Иногда их трудно диагностировать, потому что они обычно не тонико-клонические, как у взрослых.
Некротический энтероколит является громоздким состоянием. Начинается отказ от пищи и рвота без тошноты. Затем появляются лихорадка, вздутие живота и петли кишечника протягиваются через брюшную стенку; ребенок выглядит токсичным с землистым окрашиванием кожи. Наконец, кишечник перфорирован и риск смерти высок, даже при хирургическом вмешательстве.
У взрослых
У большинства взрослых симптомы легкой или умеренной интенсивности, которые не требуют интенсивного лечения. Устные антибиотики достаточно. Проблемы возникают у пожилых пациентов или пациентов с иммунодефицитом, у которых инфекции являются серьезными и опасными для жизни..
Инфекции у этих пациентов могут повлиять на желудочно-кишечный тракт, мочеиспускание, нервную систему и кожу. Наиболее частыми симптомами являются лихорадка, диарея, боль в животе, дизурия, рвота, головная боль, головокружение, судороги и кома. Также возможно найти повреждения кожи, которые служат воротами для бактерии.
Сепсис является наиболее опасной картиной у взрослых. Инфекция крови способствует посеву микробов в любой области организма и может привести к сложной клинической картине. Септические пациенты имеют полиорганную недостаточность с почечной, печеночной и дыхательной недостаточностью с высоким риском летальных последствий.
лечение
Лечение таблицы будет основываться на тяжести заболевания и пораженных системах. Все пациенты с тяжелой инфекцией Cronobacter sakazakii должны быть постоянно госпитализированы и подвергнуты мониторингу. Терапевтическое лечение заболевания включает в себя:
антибиотики
Комбинация ампициллина и гентамицина показала положительные результаты в качестве антимикробного средства против Cronobacter sakazakii.
Однако появление штаммов, устойчивых к этим антибиотикам, заставило врачей использовать цефалоспорины нового поколения и более широкого спектра, а также другие аминогликозиды или карбапенемы..
Меры поддержки
Большинство госпитализированных пациентов не переносят оральный путь, поэтому они должны получать гидратацию и парентеральное питание. Желудочные и противорвотные средства также показаны для облегчения желудочно-кишечного дискомфорта. Тяжелобольным и септическим пациентам может потребоваться вспомогательная вентиляция и постоянная ревизия..
профилактика
Профилактика необходима, чтобы избежать заражения Cronobacter sakazakii. Для всех эпидемиологических предшественников, касающихся этой бактерии, ВОЗ и ФАО опубликовали несколько рекомендаций для производителей детских смесей и, что более важно, для их приготовления..
Среди наиболее важных предложений, сделанных этими организациями, следующие:
— Подготовьте детскую смесь с водой выше 70 ° C.
— Не готовьте формулы заранее, чтобы минимизировать время хранения.
— Если необходимо хранить молоко, делайте это в холодильниках с температурой ниже 5 ° С.
Enterobacter sakazakii (представитель семейства Enterobacteriacea, с 2007 г. выделен в отдельный род Cronobacter, который включает несколько новых видов) способен вызывать тяжелые заболевания, такие, как некротические энтероколиты, менингиты и сепсис у детей первого года жизни (в первую очередь недоношенных, новорожденных с низкой массой тела или иммунокомпромисных), находящихся на искусственном вскармливании. Летальность составляет от 10 до 55%, может достигать 80%. Заболевания регистрируются как спорадические случаи и пищевые внутрибольничные вспышки, связанные с контаминацией возбудителем сухих молочных смесей, в т. ч. при очень низких уровнях возбудителя (1–10 КОЕ/г) в продукте. Неонатальный некротический энтероколит характеризуется некрозом и пневматозом кишечника, является самым распространенным тяжелым заболеванием ЖКТ у новорожденных.
Показания к обследованию
Материал для исследований. Нативные образцы фекалий, ректальные смывы, аспираты желудка, кровь, СМЖ.
Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение чистых культур микроорганизма и их родовую и видовую идентификацию; выявление ДНК E.sakazakii.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. При культуральном исследовании посев материала проводится непосредственно на плотные селективные питательные среды и хромогенные среды. Идентификация чистых культур проводится по совокупности морфологических и биохимических признаков. Учитывая сложность идентификации E.sakazakii при проведении культурального исследования по фенотипическим свойствам, целесообразно для определения видовой принадлежности выделенных культур использовать выявление ДНК возбудителя методом ПЦР. Применение методов АНК для исследования биологического материала позволяет сократить время исследований.
Показания к применению различных лабораторных исследований. Лабораторная диагностика возбудителя некротических колитов у детей раннего возраста (E.sakazakii) проводится культуральным методом в комплексе с идентификационными тестами, обеспечивающими необходимый уровень видовой идентификации или методами АНК.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Выявление у детей раннего возраста, находящихся на искусственном вскармливании, с характерной клиникой некротического энтероколита или гемоколита колонизации кишечника E. sakazakii или обнаружения ДНК возбудителя при отсутствии облигатных энтеропатогенов позволяет поставить этиологический диагноз.
Бактероиды являются анаэробными бактериями дистального отдела тонкой кишки. Большая часть каловых масс состоит из микробов, называемых Bacteroidesfragilis. Их проникновению во внутреннюю среду человеческого организма препятствуют барьерные функции слизистых оболочек ЖКТ.
Информация об исследовании
Еще они обитают в естественной микрофлоре женской репродуктивной системы, верхних и нижних дыхательных путях. При нарушении баланса микрофлоры патогенные штаммы бактероидов могут стать возбудителями разных болезней. Чаще всего это воспаление шейки матки, эндометриты, воспаления яичников и маточных труб, инфекции в малом тазу у женщин.
У мужчин эти бактерии находят при простатите или осложненном уретрите (у 6,1%, страдающих постгонорейным уретритом ), перешедшем в хроническую форму, а также когда заболевание не отступает или случаются рецидивы.
Для исследования требуется сдать такие анализы, как соскоб эпителиальных клеток с шейки матки и мочеиспускательного канала, со стенок влагалища, периуретральной зоны, крайней плоти, секрет простаты.
Показания
Анализы необходимо сдавать в следующих случаях:
если проявляются симптомы бактериального вагиноза у представительниц женского пола;
при острых воспалениях органов мочеполовой системы;
при воспалениях у женщин органов урогенитальной системы, имеющих хронический характер;
при возвращающихся простатитах и уретритах у мужского пола.
Материалы для исследования у женщин берутся после 5 дня менструального цикла, в первой его половине.
Подготовка
За 10 дней до исследования требуется прекратить лечение и прием медикаментов.
Мазок у женщин не берется во время менструации.
Мужчинам перед взятием мазка необходимо воздержаться от мочеиспускания около 2 часов.
Bacteroidesspp., определение ДНК (кач) в Ростове
Провести исследование Bacteroidesspp. в Ростове можно в нашем центре «Да Винчи», оснащенном новым качественным оборудованием, при помощи которого можно получить максимально быстрые и достоверные результаты. Звоните по указанным телефонам, чтобы записаться на прием или получить ответы на интересующие вопросы.
